小麦随机扩增多态性DNA的反应体系探索

被引:8
作者
刘列钊
陈万权
李加纳
机构
[1] 中国农业科学院植物保护研究所!植物病虫害生物学国家重点实验室北京
[2] 西南农业大学农学系重庆
[3] 中国农业科学院植物保护研究所
[4] 植物病虫害生物学国家重点实验室!北京
[5] 西南农业大学农学系!重庆
关键词
小麦; 随机扩增多态性DNA; 分子标记; 反应体系;
D O I
10.16519/j.cnki.1004-311x.2000.03.001
中图分类号
Q943 [植物细胞遗传学];
学科分类号
071007 ; 090102 ;
摘要
随机扩增多态性DNA(RAPD)是近年来发展起来的一种DNA多态性检测技术。通过以小麦基因组DNA为模板 ,对RAPD反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验 ,建立了随机扩增多态性DNA分析应用反应体系。即反应体积为 2 5μ1,Mg2 + 浓度为 2 0mM ,dNTP浓度为 150 μM ,模板DNA量 5ng~2 5ng ,随机引物量 30ng~ 4 5ng ,Tap酶 1单位 ;反应过程为 90℃变性 30s ,38℃结合 1min ,72℃延伸 2min(最后一个循环 10min) ,共 4 0个循环。该体系可有效地应用在小麦遗传育种研究中 ,重复性好 ,可靠性高。
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