单管-套式/多重聚合酶链反应在间日疟原虫基因型鉴定中的价值附视频

被引：5

作者：

黄天谊

黎学铭

刘涛

郭传坤

黄雨婷

林睿

机构：

[1] 贵州省疾病预防控制中心慢性病防治研究所

[2] 南宁市广西壮族自治区疾病预防控制中心

[3] 南宁市广西壮族自治区疾病预防控制中心贵阳

[4] 贵阳

来源：

中华检验医学杂志 | 2004年 / 10期

关键词：

疟原虫,间日; 聚合酶链反应; 基因型; 多态性,单核苷酸;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.9 [其他];

学科分类号：

100208 ;

摘要：

目的　对单管套式多重聚合酶链反应 (PCR)鉴定间日疟原虫基因型方法的应用价值进行研究。方法　以间日疟原虫环子孢子蛋白 (CSP)基因为模型 ,综合套式多重PCR、等位特异PCR和标签引物扩增等技术 ,使用PrimerPremier 5 0软件和NCBI的BLAST网络改进与优化引物设计 ,并用矩阵试验法优化反应条件和程序 ,同时 ,用单管套式多重PCR和套式PCR对 71份间日疟患者血标本的间日疟原虫基因型鉴定结果作比较。结果　单管套式多重PCR可同时扩增出 3种不同长度的基因型 /族特异片段 ,且基本消除了二聚体等噪音。用单管套式多重PCR鉴定检测 71份间日疟患者血标本 ,6 2份与套式PCR鉴定结果一致 ,并新发现 6份不同基因型和PV Ⅱ型的混合感染 ;还将 2份套式PCR鉴定为热带族的血标本纠正为PV Ⅱ型 ,1份阴性血样鉴定为温带族。结论　研究建立的单管套式 /多重PCR鉴定间日疟原虫基因型的方法 ,简化了试验步骤 ,节省了试剂耗材 ,消除了PCR噪音 ,提高了检出间日疟原虫混合感染和低度感染的敏感性 ;是一种具有发展潜力的检测单核苷酸多态性和基因型鉴定的方法

引用

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页数：4

共 2 条

[1] 我国间日疟原虫基因型种群结构及其地理分布 [J].

黄天谊 ;

黄亚铭 ;

王小力 ;

黎学铭 ;

张再兴 ;

王善青 ;

王光泽 ;

潘波 ;

黄志彪 ;

付伟忠 ;

刘惠 ;

高琪 ;

张绍清 ;

尚乐园 ;

许国君 ;

沈毓祖 ;

刘涛 ;

李蓬 ;

曾风秀 ;

车莹 .

中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2001, (05) :4-8

[2] 间日疟原虫环子孢子蛋白基因型的鉴别研究 [J].

黄天谊 ;

王小力 ;

黎学铭 ;

黄亚铭 ;

曾风秀 ;

车莹 ;

张思淼 ;

付伟忠 ;

张再兴 ;

张国森 ;

蔡贤铮 ;

王善青 ;

王光泽 .

中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2000, (05) :18-22

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