谷子乙酰辅酶A羧化酶BC功能域的克隆及原核表达载体的构建

被引：13

作者：

楚敏

赵虎基

郑明刚

刘红玲

乐锦华

机构：

[1] 石河子大学生物工程学院,中国农业大学,石河子大学生物工程学院,石河子大学生物工程学院,石河子大学生物工程学院新疆石河子,北京,新疆石河子,新疆石河子,新疆石河子

来源：

石河子大学学报(自然科学版) | 2004年 / 05期

关键词：

ACCase; BC功能域; 克隆; 原核表达; 载体;

D O I：

暂无

中图分类号：

S515 [粟（谷子、小米）];

学科分类号：

090103 [种子科学与技术];

摘要：

根据已知的乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)序列设计合成了1对引物,对ACCase基因的BC功能域进行扩增,所得产物与预期片段大小一致,约1.8kb。该片段与克隆载体PGEM TEase连接,转入感受态大肠杆菌DH5а中增殖。提取质粒进行PCR鉴定,将阳性克隆与原核表达载体PQE30分别用KpnⅠ和SalⅠ双酶切后回收目的片段进行连接,并转入感受态大肠杆菌M15中,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确。

引用

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