脐血间充质干细胞培养条件的优化

目的探讨脐血间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）的培养扩增条件。方法取2004-10～2005-02广州华侨医院产科胎儿脐带血,比较不同的分离方法、接种密度、首次换液时间、不同的培养基对脐血中的间充质干细胞原代培养过程的影响,以流式细胞仪对优化条件下培养的间充质干细胞进行细胞周期分析,细胞表面标志检测,多种成分联合诱导其向脂肪、成骨方向分化,细胞化学染色检测诱导后的细胞变化。结果在其他条件不变的情况下,羟乙基淀粉沉淀法优于Ficoll分离法,5×106/cm2是脐血MSC培养的适宜接种密度,首次换液时间为7d。优化条件下培养的间充质干细胞不表达造血细胞系的标志(CD34/CD45/CD14)及内皮细胞的标志CD106,强表达CD29、CD44、CD13,在适当的诱导条件下可向脂肪及成骨方向分化。结论脐血中含有MSC,可以作为组织工程的种子细胞。