杏叶片与果实总RNA提取方法研究

以杏叶片及幼果为材料,分别从操作耗时、RNA质量和产量等方面比较了CTAB法、改良CTAB法、Trizol法、SDS-苯酚法和改良SDS法5种不同的RNA提取方法。结果表明:5种方法均能从幼嫩叶片中提取到总RNA;经电泳检测,28S rRNA和18S rRNA两条主带清晰,A260/A280均大于1.8;其中以Trizol法提取效果最佳,改良CTAB法次之,产量分别达到了839.25μg/g和395.21μg/g。在果实RNA提取过程中,改良SDS法以及改良CTAB法能有效减少果实RNA的提取中酚类物质和多糖等杂质的影响,获得质量较高的RNA,二者产量分别为352.65μg/g和361.95μg/g。每种方法提取的叶片和果实的RNA经反转录后形成cDNA,并进行RT-PCR扩增,成功扩出看家基因泛素蛋白UBQ片段,说明了RNA质量能够满足文库构建、基因克隆等研究需要。