人结肠癌细胞中组蛋白乙酰化对细胞周期调节基因表达的影响

目的　研究组蛋白乙酰化对Colo 32 0和SW1116人结肠癌细胞系p2 1WAF1和p16 INK4A基因表达的影响。方法　培养人结肠癌细胞系SW1116和Colo 32 0 ,分别以去甲基化制剂 5 氮脱氧胞苷 (5 aza dC)和 /或组蛋白脱乙酰化酶 (HDAC)抑制剂曲古抑菌素 (TSA)及丁酸钠 (NaBu)干预细胞。运用流式细胞术检测细胞周期变化 ;以定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法研究控制细胞周期的基因p2 1WAF1和p16 INK4A的表达 ;染色质免疫沉淀技术分析基因相关染色质乙酰化组蛋白的水平。结果　TSA或NaBu使人结肠癌细胞阻滞于G1期 ,而 5 aza dC并不能改变细胞周期。正常情况下 ,SW1116和Colo 32 0细胞中均有较弱的p16 INK4A表达 ;两种结肠癌细胞系p2 1WAF1表达缺如。 5 aza dC干预后 ,p16 INK4A表达增强 ,相反p2 1WAF1仍无明显表达。当该两个细胞系经TSA或NaBu处理后 ,p2 1WAF1转录水平明显上调 ,并诱导p2 1WAF1基因相关染色质乙酰化组蛋白H3和H4的积聚。结论　两种人结肠癌细胞系中 ,HDAC抑制剂通过选择性增加p2 1WAF1基因相关染色质乙酰化水平 ,上调p2 1WAF1基因的转录 ,并相应地导致结肠癌细胞生长停滞 ;而p16 INK4A基因表达主要受甲基化调节。