半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中过量表达及IPTG诱导条件

被引:19
作者
陈卫
葛佳佳
张灏
丁霄霖
机构
[1] 江南大学食品学院
[2] 江南大学食品学院 江苏无锡
[3] 江苏无锡
关键词
嗜热脂肪芽孢杆菌; β-半乳糖苷酶; 基因克隆; T7表达系统; 大肠杆菌; 诱导条件;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
从嗜热脂肪芽孢杆菌 (IAM 110 0 1)中克隆出编码热稳定的半乳糖苷酶蛋白基因bgaB ,构建具T7强启动子的pET 2 0 (b) bgaB质粒 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)中进行表达 .经IPTG诱导后 ,重组菌周质中乳糖酶酶活达到 0 .12U /mL ,胞内酶活为 1.35U /mL ,比酶活为 6 .6 6U/mg蛋白 ,比酶源菌产生的酶活提高 5 0倍 .通过对IPTG诱导时机、诱导浓度和诱导时间的优化研究 ,重组菌产生的比酶活进一步提高至酶源菌的 90倍 .
引用
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页数:4
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