脂质体介导C-erbB-2反义寡核苷酸转染小鼠乳腺癌TM40D细胞的效率及毒性

目的探讨阳离子脂质体为载体的反义寡核苷酸(ODNs)转染小鼠乳腺癌TM40D细胞的最佳转染效率及对细胞的毒性作用。方法分别将有/无脂质体介导的反义ODNs转染小鼠乳腺癌TM40D细胞,应用流式细胞仪观察不同时间的反义ODNs的转染效率,荧光显微镜观察反义ODNs在细胞内的分布,全自动生化分析仪检测转染培养上清液的乳酸脱氢酶(LDH)浓度。结果无脂质体介导的反义ODNs转染细胞效率随着时间的延长增加,6h达到63.00%。脂质体介导的反义ODNs转染细胞4h时转染效率达到高峰为72.23%。细胞内荧光强度与细胞转染效率相关。无脂质体介导的FAM标记的反义ODNs分布在细胞浆,脂质体介导的反义ODNs在细胞浆及细胞核内均有分布。各组LDH浓度无统计学差异。结论脂质体介导组反义ODNs转染效率高于无脂质体组,同时转染高峰提前出现。脂质体促进反义ODNs进入细胞核内。短时间内阳离子脂质体及反义ODNs对细胞的毒性不明显。