番茄果实ABA合成酶NCED基因的克隆及其RNAi遗传转化体系的建立

被引：21

作者：

王玲 ^{[1
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孙亮 ^{[1
]}

冷平 ^{[1
]}

王永军 ^{[2
]}

徐丽哲 ^{[2
]}

机构：

[1] 中国农业大学农学与生物技术学院

[2] 北京市平谷区科学技术委员会

来源：

中国农业大学学报 | 2009年 / 14卷 / 05期

关键词：

番茄; NCED基因; ABA; 再生; 转化; RNAi;

D O I：

暂无

中图分类号：

S641.2 [番茄（西红柿）];

学科分类号：

090201 [果树学];

摘要：

以番茄为材料,根据ABA合成关键酶编码基因NCED的保守序列设计引物,通过RT-PCR方法从番茄果实中克隆了2个NCED基因片段,Le NCED1和Le NCED2。通过农杆菌介导法进一步建立了‘嘉宝’番茄Le NCED1基因的RNAi再生和转化体系,并研究影响番茄遗传转化的4个因素外植体类型、预培养时间、激素组合、农杆菌侵染时间。结果表明:番茄子叶预培养2 d,用农杆菌LBA4404侵染5 min后,避光共培养2 d,在加入1mg/L 6-BA+0.05 mg/LIAA+5 mg/L潮霉素的MS培养基上可以诱导出芽,转入添加0.1 mg/LIAA+7 mg/L潮霉素的1/2 MS培养基上可以使芽生根。本实验共获得26株抗性植株。GUS染色证明,有9株抗性植株成功转入含有NCED基因RNAi载体的T-DNA,为深入了解ABA促进番茄果实成熟的机理提供了方法和材料。

引用

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页数：7

共 10 条

[1]

番茄组织再生及其遗传转化体系的优化 [J].