循环静水压力对维持兔软骨细胞表型的影响

被引:20
作者
黄正 [1 ]
傅文 [1 ]
冯伟 [1 ]
张凤华 [2 ]
朱雅萍 [1 ]
魏立 [1 ]
周琦 [1 ]
袁石福 [1 ]
黄好 [3 ]
杜宁 [2 ]
机构
[1] 上海市交通大学医学院附属瑞金医院伤骨科研究所
[2] 上海市交通大学医学院附属瑞金医院伤科
[3] 上海市仁和医院口腔科
基金
上海市自然科学基金;
关键词
软骨细胞; 压力; 细胞培养技术;
D O I
暂无
中图分类号
R329 [人体组织学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的:本研究将兔软骨细胞放在静水压力负载装置中培养,并传代,施加不同频率和大小的静水压,观察其对兔软骨细胞表型的影响。方法:用酶消化法获取兔关节软骨细胞,分别在不同的压力和频率下作普通培养瓶贴壁的单层培养,并传代。40 kPa循环静水加压为实验组,40 kPa持续静水加压培养和常压培养作为对照。Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原免疫组化,苏木素套核染色,倒置显微镜观察摄像。以RT-PCR方法检测软骨细胞中蛋白聚糖、聚集蛋白聚糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原mRNA的表达。结果:在循环静水压力下培养,软骨细胞有较高的细胞增殖率,培养至第7代未见明显表型改变,仍然表达Ⅱ型胶原、蛋白聚糖和聚集蛋白聚糖等。常压培养,软骨细胞传代至第5代以后,逐渐失去软骨细胞的特有表型。而持续静水压力培养的软骨细胞传代至第3代以后就开始逐渐失去软骨细胞的特有表型。结论:一定的循环静水压力能维持软骨细胞的合成分泌功能,有助于软骨细胞特有表型的稳定。
引用
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