兽疫链球菌原生质体激光诱变及高产菌株筛选

探索了透明质酸 (Hyaluronicacid)产生菌—兽疫链球菌 (Streptococcuszooepidemicus)原生质体制备与再生的最佳条件。研究了酶浓度、酶解时间、高渗液的选择、预处理及高渗预培养等因素的影响。确定了最佳条件为 :经 1 2 %甘氨酸预处理及高渗预培养共同作用2h后 ,用 5 0U mL溶菌酶 ,在NaCl高渗体系中 ,于 39℃作用 60min。在此条件下 ,原生质体形成率可达 94 6% ,再生率可达 1 8 5 %。用不同功率的He Ne激光照射不同时间诱变原生质体 ,当功率密度为 40mW cm2 ,照射时间为 30 0s时 ,其致死率可达 99 88%。从存活变异株中筛选出一株高产透明质酸菌株 ,其产量 ( 2 2 1g L)达原始菌株 ( 0 49g L)的 4 5倍。