H5亚型禽流感病毒一步法复合RT-PCR检测方法的建立

被引：5

作者：

包红梅 ^{[1
]}

王秀荣 ^{[1
]}

李一经 ^{[2
]}

陈化兰 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家动物流感重点开放实验室

[2] 东北农业大学动物医学院

来源：

中国兽医学报 | 2008年 / 07期

关键词：

禽流感病毒; 一步法复合RT-PCR; H5N1; 亚型鉴别; 快速诊断;

D O I：

10.16303/j.cnki.1005-4545.2008.07.016

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

针对近年来H5亚型禽流感（AI）频发的严峻形势,本研究通过分析GenBank中AI的221个HA基因和M基因序列,在保守区内用Oligo4.0软件设计合成2对引物,建立了能同时鉴别AIV型与亚型的一步法复合RT-PCR,其扩增的目的片段大小分别为372、229 bp。通过对AIV尿囊液和棉拭子浸出液进行不同稀释倍数检测,结果病毒在尿囊液最低检出量为10-4稀释。用病毒分离和该方法同时检测不同脏器、口咽及泄殖腔棉拭子样品,结果该方法检测灵敏度比病毒分离低10～100倍。用该方法检测H1H15亚型AIV和鸡新城疫病毒等其他14种禽病毒,结果所有AIV均有M基因229 bp的目的条带,且仅H5亚型AIV有372 bp的特异性条带,而其他14种禽病毒无任何目的条带。

引用

页码：804 / 808

页数：5

共 4 条

[1] 禽流感病毒H5和H9亚型多重RT-PCR快速检测方法的建立附视频 [J].

耿士忠 ;

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黄金林 ;

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中国兽医学报, 2006, (02) :160-161

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