松针油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究

目的研究松针油对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用,探讨Hela细胞发生凋亡的分子机制。方法采用水蒸气蒸馏法提取松针油,气相色谱-质谱联用仪分析成分。MTT法测定松针油对Hela细胞增殖的影响。流式细胞仪和Hochest 33258检测药物作用前后细胞凋亡的情况。应用Western blotting观察Hela细胞caspase-3酶原的变化。用caspase活性检测试剂盒检测caspase-3,8,9的活性。结果MTT结果显示松针油对Hela细胞生长有明显的抑制作用,呈显著的时间和浓度依赖性。流式细胞仪分析显示松针油诱导Hela细胞发生凋亡,细胞表现出典型的凋亡特征,并且可见凋亡小体,且凋亡率具有时间依赖性。松针油诱导Hela细胞凋亡过程中caspase-3被激活。Caspase-8,9活性增高,又有时间依赖性,且有时间顺序。结论松针油对Hela细胞的生长有明显的抑制作用,其作用机制是松针油可诱导Hela细胞发生凋亡。在诱导细胞凋亡的过程中,caspase-3的激活是介导Hela细胞发生凋亡的共同通路。同时,活化的caspase-8,9可能参与了caspase-3的激活,从而诱导凋亡的发生。