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分子克隆实验指南.[M].[美]萨姆布鲁克(Sambrook;J·)等 著;金冬雁等 译.科学出版社.1992,
马铃薯S病毒外壳蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引：7
作者：
李广存
杨煜
王秀丽
杨元军
毕玉平
机构：
[1] 山东省农业科学院生物中心
[2] 山东省农业科学院蔬菜研究所
[3] 山东省农业科学院生物中心 济南
[4] 济南
来源：
关键词：
马铃薯;
马铃薯S病毒;
外壳蛋白基因;
RT-PCR;
序列分析;
Western印迹;
抗血清制备;
D O I：
10.16420/j.issn.0513-353x.2004.04.028
中图分类号：
S435.32 [马铃薯（土豆）病虫害];
学科分类号：
090401 ;
090402 ;
摘要：
以田间采集的马铃薯病叶中提取的马铃薯病毒S(PVS)总RNA为模板,通过RT-PCR获取长度为890 bp的PVS-cp的cDNA,克隆至pGEM-T载体上。酶切回收该基因片段,并构建了该基因的原核表达质粒pBV-pvs。SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析表明:PVS-cp基因在大肠杆菌JM109中可特异地高效表达分子量约33kD的蛋白,且表达蛋白具有良好的抗原活性。利用该表达产物免疫动物家兔,获得的抗血清可用于大田马铃薯S病毒的快速检测。
引用
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