本研究的目的是建立采用高效液相色谱测定牛乳中掺加胶原水解蛋白的方法。其基本原理是通过高效液相色谱法测得羟脯氨酸的含量,由测得的羟脯氨酸含量换算得出乳中掺加的胶原水解蛋白的量。以symmetry-C18(150 mm×3.9 mm,i.d.5μm)为色谱柱,2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,梯度洗脱。流动相A:浓度为0.05 mol/L乙酸钠缓冲溶液(pH=6.5,含10 mL/L四氢呋喃),流动相B:乙腈-水(体积比1︰1)。羟脯氨酸质量浓度在2~10 mg/L的范围内与峰面积之间具有良好的线性关系,回收率为93.47%~101.20%,检出限为2.5 mg/L。测定结果的相对标准偏差为1.62%。