应用双倍PCR技术快速检测大豆胞囊线虫

被引:1
作者
彭德良
S A Subbotin
Maurice Moens
唐文华
机构
[1] 中国农业科学院植物保护研究所!北京
[2] InstituteofParasitologyofRussianAcademyofSciences!LeninskiiProspect
[3] Moscow
[4] 不详
[5] Russia
[6] AgriculturalResearchCentre
[7] CropProtectionDepartment!BurgVanGansberghelaan
[8] Merelbeke
[9] Belgium
[10] 中国农业大学植物保护学院
关键词
大豆胞囊线虫; DNA检测技术; 特异性引物;
D O I
暂无
中图分类号
S432.45 []; S435.651 [大豆病虫害];
学科分类号
摘要
描述了一种基于双倍PCR技术 ,用种特异性引物快速鉴定大豆胞囊线虫方法。应用两组引物扩增胞囊线虫的rDNA。第一组引物含有2个通用引物D3A和D3B ,用于扩增大亚基核糖体基因(28SrDNAgene)的D3扩展区 ;第二组引物包括大豆胞囊线虫种特异性引物GlyF1和一个通用引物rDNA2,用于扩增ITS2区的片断和部分28S基因。用此双倍PCR扩增技术检测了来自中国、俄罗斯、美国和巴西的53个大豆胞囊线虫群体 ,结果表明 ,用两组引物进行双倍PCR扩增 ,所有53个大豆胞囊线虫群体都产生两个明显的片断(181bpand345bp) ,其中181bp片断是SCN特异性引物GlyF1和rDNA2扩增出大豆胞囊线虫中特异性片断。在所测试的其它胞囊线虫群体 ,仅仅扩增出345bp的片断 ,而不能扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断。用该项技术能从大豆胞囊线虫的单个胞囊或单头二龄幼虫的微量DNA中 ,扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断 ,该技术的敏感性达到单条二龄幼虫的水平
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共 3 条
  • [1] Identification of cyst forming nematodes of the genus Heterodera (Nematoda: Heteroderidae) based on the ribosomal DNA-RFLP[J] . Sergei A. Subbotin,Lieven Waeyebernge,Maurice Moens. &nbspNematology . 2000 (2)
  • [2] History and status of soybean cyst nematode in China. Liu X Z,Li J Q,Zhang D S. International Journal of Nematology . 1997
  • [3] Complete characterization of the race scheme for Heterodera glycines. Riggs R D,Schmitt D P. Journal of Nematology . 1988