Na+/Ca2+交换调节的La3+跨淋巴细胞膜的定量研究

被引:4
作者
魏春英
杨频
王海雁
机构
[1] 山西大学分子科学研究所
[2] 山西大学分子科学研究所 太原
[3] 太原
基金
国家自然科学基金重大项目;
关键词
Na+/Ca2+交换; 淋巴细胞; Ouabain; 荧光指示剂; La3+;
D O I
暂无
中图分类号
Q493 [新陈代谢与营养];
学科分类号
090502 ;
摘要
利用荧光浓度指示剂fura-2研究了La3+能否利用Na+/Ca2+交换系统进入人外周血淋巴细胞以及La3+对Na+/Ca2+交换的影响.并首次用此方法研究了La3+能否在细胞器(主要为内质网和线粒体)中蓄积.实验结果表明,用乌本苷预处理细胞并在无Na+介质中测试,可明显观察到La3+跨膜进入淋巴细胞,而且胞内La3+的浓度与胞外的La3+浓度成正比.但当胞外La3+浓度大于0.4mmol/L时,不再观察到340/380nm荧光比值的变化,此时细胞内La3+浓度约为15×10-12mol/L.当La3+浓度较大时(0.1mmol/L)抑制Na+/Ca2+交换操纵的Ca2+的进入,而较低浓度(0.01mmol/L)时却刺激Ca2+进入.另外从实验结果可推测La3+可以被依赖ATP的质膜钙泵泵出胞外.胞内钙库用离子霉素耗竭后,La3+内流过程中再次加入离子霉素后,可明显观察到340/380nm荧光比值增大,说明La3+在细胞器中有一定程度的蓄积.在模拟胞内离子组分的缓冲液中(pH=7.05),fura-2对La3+的检测限为10-12mol/L,对Ca2+的检测限为10-8mol/L,并测得fura-2-La3+的络合比为1:1,表观离解常数为1.7×10-12mol/L.
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