建立PCR—ELISA方法检测单核细胞增多性李斯特菌

被引:7
作者
谭炳乾 [1 ]
何启盖 [1 ]
肖军 [2 ]
金梅林
陈焕春 [1 ]
机构
[1] 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
[2] 襄樊出入境检验检疫局
关键词
单核细胞增多性李斯特菌; PCR; PCR-ELISA;
D O I
暂无
中图分类号
S854.43 [];
学科分类号
0906 ;
摘要
针对hlyA基因应用Primer Premier 5.0软件设计特异性引物和探针,在上游引物5’端标记生物素,核酸探针的3’端标记地高辛,将PCR扩增、核酸液相杂交以及酶联显色技术结合,并对检测条件进行了优化,建立了PCR和PCR-ELISA检测食品样品中单核细胞增多性李斯特菌(Listria monocytogenes)的方法。经对试验菌株检测表明,PCR、PCR-ELISA方法检测单核细胞增多性李斯特菌能扩增出特异片段,其它李斯特菌(Listeria)、大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)等扩增检测结果是阴性。对60个样品进行检测表明,SN/T0148.1-2005方法与PCR-ELISA方法阳性检出率分别为11.7%和16.7%。与PCR产物电泳法检测比较,PCR-ELISA方法进一步提高检测方法的敏感性和特异性,敏感性高于前者150倍以上。
引用
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