嗜热真菌 Thermomyces lanuginosus热稳定a—淀粉酶的纯化及特性

被引:5
作者
李多川
杨依军
彭友良
沈崇尧
周培瑾
黄亦存
机构
[1] 中国农业大学植病系
[2] 中国科学院微生物研究所
[3] 中国科学院微生物研究所 北京
[4] 北京
[5] 北京
关键词
嗜热真菌; Thermomyces lanuginosus; α-淀粉酶;
D O I
10.13343/j.cnki.wsxb.1997.02.005
中图分类号
Q936 [微生物生物化学];
学科分类号
071010 ;
摘要
嗜热真菌Thermomyces lanuginosus在液体培养基中于50℃静止培养14d,培养液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Toyopearl离子交换层析、Butyl-Toyopearl疏水层析、SephacrylS-300分子筛层析和FPLC MonoQ离子交换层析,得到了凝胶电泳均一的淀粉酶。纯酶与淀粉反应不同时间后,用碘色反应法和DNS法测定淀粉和还原糖量,结果显示淀粉量在开始时迅速下降,但还原糖的量却增加很慢;产物经TLC层析分析为麦芽糖和少量葡萄糖。由此说明它为α-淀粉酶。用SDS-PAGE和Sephacryl S-300分子筛层析测定分子量为56000,不具亚基。酶反应最适温度和pH分别为65℃和4.5~5.0。在pH4.6条件下,酶在50℃是稳定的;60℃保温1h,仍保留94%的原酶活性;酶在70℃的半衰期为10min。钙离子对酶有激活作用。酶对糖原和糊精有一定的水解能力。
引用
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