树状多节孢酸性磷酸酶的分离纯化与性质研究

被引：4

作者：

张国庆 ^{[1
,2
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王有志 ^{[3
]}

王守现 ^{[4
]}

王贺祥 ^{[2
]}

陈青君 ^{[1
]}

机构：

[1] 北京农学院农业部都市农业(北方)重点实验室

[2] 中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室

[3] 中国科学院微生物研究所菌种保藏中心

[4] 北京市农林科学院植物保护环境保护研究所

来源：

菌物学报 | 2011年 / 05期

关键词：

树状多节孢; 酸性磷酸酶; 性质; 酶活性;

D O I：

10.13346/j.mycosystema.2011.05.017

中图分类号：

Q814.1 [酶的分离与提纯];

学科分类号：

082203 ;

摘要：

树状多节孢Nodulisporium sylviforme是从东北红豆杉Taxus cuspidata分离、可产生紫杉醇的内生真菌。研究以树状多节孢为材料,利用液体发酵手段获得菌丝体,通过CM-cellulose阴离子交换柱层析、Q-Sepharose阳离子交换柱层析和FPLC凝胶过滤层析(Superdex 75),获得纯化的树状多节孢酸性磷酸酶蛋白(Nod-ACP)。结合FPLC和SDS-PAGE分析,判定该磷酸酶为分子量44kDa单亚基蛋白。酶学性质研究表明,其最适pH值为3.0,最适温度为58℃。6.25-50mmol/L的Ca2+、Mn2+、Mg2+和Zn2+对酶活有30%-50%的促进作用,而Cu2+、Al3+和Fe3+对酶活有显著的抑制作用;当Fe2+浓度低于25mmol/L时表现为促进作用,但浓度达到50mmol/L时磷酸酶完全失活。

引用

页码：753 / 759

页数：7

共 15 条

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