植物转基因成分PCR检测内对照系统的建立

为了建立适用于多种植物的转基因成分PCR检测的内对照系统 ,本文针对植物叶绿体DNArbcL基因的保守区域 ,设计了一对扩增片段为 4 33bp的PCR引物 ,通过对 2 3种植物的PCR扩增表明 ,该引物不但在 4种单子叶植物 (大米、玉米、小麦、洋葱 )、 10种原始花被亚纲的双子叶植物 (甘蓝、白菜、大豆、豇豆、花生、胡萝卜、芹菜、菠菜、大麻、棉花 )及 7种合瓣花亚纲的双子叶植物 (圣女果、番茄、辣椒、马铃薯、南瓜、黄瓜、菊苣 )中得到了稳定一致的扩增结果 ,而且在低等的藻类植物 (海带、龙须菜 )中也得到了特异性的扩增结果。进一步对扩增片段进行的DNA序列测定与分析表明 ,扩增片段的变异水平较低 ,具有较高的保守性。本系统的建立有助于排除PCR检测时的假阴性结果 ,从而提高检测的准确性 ,而且能克服现行的“一种植物一种检测内对照”的弊端 ,有利于提高检测效率、缩短检测周期。