一种通用的从少量培养液中快速提取细菌染色体DNA的方法

被引:27
作者
刘刚
翟朝阳
机构
[1] 四川大学基础医学与法医学院生物化学与分子生物学实验室
关键词
细菌; 染色体DNA; 提取方法;
D O I
暂无
中图分类号
Q933 [微生物遗传学];
学科分类号
071007 ;
摘要
目的 建立一种通用、快速、简便的提取细菌染色体DNA的方法。方法 用丙酮破坏细菌细胞壁膜脂质结构 ,裂解液破除细菌细胞膜 ,释放胞内核酸 ,经酚 /氯仿 /异戊醇去除蛋白质及多糖 ,无水乙醇沉淀DNA ,TE缓冲液溶解DNA。结果 提取染色体DNA的琼脂糖电泳图谱 ,对于G 杆菌与经典的CTAB法提取的DNA图谱相同 ,对于G +球菌其效果要明显好于CTAB法。所得DNA能被HindⅢ酶切消化 ,能用于RAPD扩增。结论 这种提取染色体DNA的新方法 ,对于所收集的 8种不同的细菌都有较好的结果 ,是一种通用的细菌染色体DNA提取方法。
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共 3 条
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  • [3] PCR Analyses of tRNA Intergenic Spacer, 16S-23S Internal Transcribed Spacer, and Randomly Amplified Polymorphic DNA Reveal Inter-and Intraspecific Relationships of Enterobacter cloacae Strains. Maysa M. Clementino, Ivano de Filippis, Carlos R. Nascimento, et al. Journal of Clinical Microbiology . 2001