周期性流体应力刺激对组织工程软骨分化影响的实验研究

目的 研究周期性流体应力刺激对组织工程软骨体外分化的影响,确立良好的动态培养方案。方法 穿刺吸取成年兔骨髓,密度梯度离心法分离扩增骨髓间充质干细胞(Bone marrow derived mesenchymal stem cell,MSC)。以2.0×10～7/ml密度复合于纤维蛋白胶,制成圆柱形人工组织。实验组材料经受周期为0.2Hz流体应力刺激,于转壁生物反应器中培养2周,对照组静止培养,两组均于条件培养基内诱导软骨组织形成。2周后观察大体形态、和组织学形态、Ⅰ型和Ⅱ型胶原免疫组织化学表达,测量细胞活力和胶原、蛋白多糖含量等生化指标。结果 应力刺激组材料的大体形态完整,而对照组材料破碎回缩。实验和对照组均可以诱发材料中MSC分化成为软骨细胞,但流体刺激组表达更高水平的Ⅱ型胶原和蛋白多糖,细胞活力明显高于对照静止培养组(P<0.01)。结论 周期性流体应力刺激明显促进MSC体外软骨分化,转壁生物反应器培养优于单纯静止培养。