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导入外源DNA片段的花生根瘤菌高效基因工程菌株的构建
被引：2
作者：
李立家，周俊初，陈华癸
机构：
[1] 华中农业大学生物技术中心，武汉大学生命科学学院
来源：
关键词：
花生根瘤菌，基因文库，工程菌，外源DNA;
D O I：
10.13300/j.cnki.hnlkxb.1994.03.002
中图分类号：
Q939.114 [];
学科分类号：
071005 ;
100705 ;
摘要：
以柯斯质粒ｐＬＡＦＲ１为载体先构建快生型花生根瘤菌８５－７菌株总ＤＮＡ的基因文库。在协助质粒ｐＲＫ２０１３帮助下用此基因文库分别同菌株８５－７和另一株慢生型花生根瘤菌菌株Ｃ０２－５作三亲本杂交。转移接合子接种沙培条件下生长的花生，通过结瘤试验初筛选和复筛选，共筛选出３株工程菌ＨＮ１１、ＨＮ１２（以８５－７为受体）和ＨＮ１３（以Ｃ０２－５为受体）。其每植株根瘤的固氮酶活分别比出发菌株的提高３０２％（ＨＮ１１）、３５６％（ＨＮ１２）和２８４％（ＨＮ１３）；每植株干重分别比出发菌株的提高８５％（ＨＮ１１）、８３％（ＨＮ１２）和２８％（ＨＮ１３）。工程菌株的重组质粒酶切分析表明，除载体ｐＬＡＦＲ１外还分别含有２５ｋｂ（ｐＨＮ１１）、１４ｋｂ（ｐＨＮ１２和１８ｋｂ（ｐＨＮ１３）的外源片段。
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