ROBO4过表达抑制高糖条件下人肾小球内皮细胞高通透性的体外研究

被引:3
作者
唐璐瑶
刘军辉
候世会
官涛
黄云剑
机构
[1] 第三军医大学新桥医院肾内科
关键词
ROBO4; ARF6; 通透性; 基因过表达; 糖尿病肾病;
D O I
暂无
中图分类号
R692.9 [其他疾病]; R587.2 [糖尿病性昏迷及其他并发症];
学科分类号
1002 ; 100210 ; 100201 ;
摘要
目的探讨ROBO4基因过表达对高糖诱导的人肾小球内皮细胞(HRGEC)高通透性的影响。方法体外培养HRGEC,以携带ROBO4基因的重组慢病毒载体感染HRGEC获得过表达ROBO4的HRGEC。将细胞分为低糖培养组和高糖培养组,采用Western blotting检测ROBO4和ARF6蛋白的表达,异硫氰酸荧光素右旋糖酐(FITC-Dextran)法检测HRGEC的通透性,CCK-8法测定细胞存活率。结果慢病毒在HRGEC中的72h转染率达80%,与空载体组相比ROBO4转染组HRGEC细胞的ROBO4蛋白明显过表达(P<0.05),CCK8检测显示慢病毒转染后HRGEC细胞活性不受影响。与低糖组相比,高糖组ROBO4蛋白表达在12h时点明显增高(P<0.05),24h回落,72h下降最为明显(P<0.05),而ARF6蛋白的表达在12h开始明显升高,72h时升高最为明显(P<0.05)。高糖组FITC-Dextran层HRGEC屏障的通透性在24h开始逐步升高,72h时升高最为明显(P<0.05);与空载体组相比,ROBO4过表达可显著抑制高糖条件下ARF6的表达及降低体外单层HRGEC屏障的FITC-Dextran通透性。结论 ROBO4过表达可降低高糖条件下HRGEC的通透性,激活ROBO4有望成为治疗糖尿病肾病内皮功能障碍的新方向。
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黄云剑 .
解放军医学杂志, 2016, 41 (04) :267-272
[2]  
Endothelial Robo4 suppresses breast cancer growth and metastasis through regulation of tumor angiogenesis[J] . Helong Zhao,Dinesh K. Ahirwar,Steve Oghumu,Tasha Wilkie,Catherine A. Powell,Abhay R. Satoskar,Dean Y. Li,Ramesh K. Ganju.Molecular Oncology . 2015
[3]  
Role of ROBO4 Signalling in Developmental and Pathological Angiogenesis[J] . Suresh Singh Yadav,Gopeshwar Narayan,Manoor Prakash Hande.BioMed Research International . 2014
[4]   Acute and sustained actions of hyperglycaemia on endothelial and glomerular barrier permeability [J].
Sward, P. ;
Rippe, B. .
ACTA PHYSIOLOGICA, 2012, 204 (03) :294-307
[5]   Robo4-dependent Slit signaling stabilizes the vasculature during pathologic angiogenesis and cytokine storm [J].
London, Nyall R. ;
Li, Dean Y. .
CURRENT OPINION IN HEMATOLOGY, 2011, 18 (03) :186-190
[6]   Dynamics of endothelial cell behavior in sprouting angiogenesis [J].
Eilken, Hanna M. ;
Adams, Ralf H. .
CURRENT OPINION IN CELL BIOLOGY, 2010, 22 (05) :617-625
[7]   ARF6-Regulated Shedding of Tumor Cell-Derived Plasma Membrane Microvesicles [J].
Muralidharan-Chari, Vandhana ;
Clancy, James ;
Plou, Carolyn ;
Romao, Maryse ;
Chavrier, Philippe ;
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D'Souza-Schorey, Crislyn .
CURRENT BIOLOGY, 2009, 19 (22) :1875-1885
[8]   Endothelin-1 promotes migration of endothelial cells through the activation of ARF6 and the regulation of FAK activity [J].
Daher, Zeinab ;
Noel, Josette ;
Claing, Audrey .
CELLULAR SIGNALLING, 2008, 20 (12) :2256-2265