重组腺相关病毒介导的nm23H1对转移性卵巢癌原位移植模型的逆转研究

目的　构建含转移抑制基因nm2 3H1全长的重组腺相关病毒 (rAAV nm2 3H1) ,探讨rAAV nm2 3H1对以人卵巢癌细胞株SW6 2 6所建立的转移性原位移植模型转移性逆转的可行性。方法　用基因重组方法构建含nm2 3H1全长的重组腺相关病毒骨架质粒pUF1 nm2 3H1,磷酸钙沉淀法将腺相关病毒载体系统共转染入病毒包装细胞 2 93细胞中 ,分别合成rAAV nm2 3H1和rAAV Laz ,并测定其转染效率 ,斑点杂交法测定重组病毒的滴度。建立转移性卵巢癌原位移植模型 ,观察其生物学特性 ,并用免疫蛋白印迹法检测瘤体nm2 3H1表达。肿瘤原位移植术后第 10天对空白对照组 (12只小鼠 )、rAAV Laz组 (13只小鼠 )和rAAV nm2 3H1组 (13只小鼠 )分别行腹腔注射 ,观察rAAV nm2 3H1对转移性卵巢癌模型的肝转移率和生存时间的影响。结果　成功构建并鉴定了rAAV nm2 3H1和rAAV Laz,滴度均为 1× 10 10 个病毒分子 /ml,转染效率为 70 %。生物学特性证明构建的卵巢癌模型属转移性 ;腹腔注射后 ,rAAV nm2 3H1组瘤体中nm2 3H1的表达明显高于空白对照组 (P <0 0 5 )。空白对照组、rAAV Laz组、rAAV nm2 3H1组平均生存时间分别为 :10 6 6 7d、10 7 0 6d、136 6 7d ;空白对照组与rAAV Laz组间的生存率比较P =0 0 5 9,P >0 0 5 ;rAAV nm2 3H1组和rAAV