体外评价抗生素对人重组骨形成蛋白-2诱骨活性的影响

目的研究抗生素对骨形成蛋白诱骨活性的影响。方法以人骨髓成骨细胞为作用细胞,选用合适剂量的人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2m)为作用底物,分别加入不同浓度的替硝唑(Tinidazole,TNZ)、克拉霉素(Clarithromycin,CLM),以及二者的混合物进行体外培养,96h后观察细胞生长情况,MTT法测定细胞活力,并检测定细胞内碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase,ALP)活性。结果(1)高剂量(≥1000μg/ml)的克拉霉素对人骨髓成骨细胞的增殖具有轻微的抑制作用,而高剂量的替硝唑则有一定的细胞毒性,较多的细胞漂浮,裂解为碎片;联合用药对细胞增殖的影响与替硝唑剂量成正比。(2)药物对碱性磷酸酶活性的影响,同细胞的增殖程度成正相关,剂量小于1000μg/ml时对酶活性无影响。结论局部应用克拉霉素和替硝唑应选用小于1000μg/ml的药物浓度为宜;两抗生素对BMP的诱骨活性并不产生直接的影响,而是由于对细胞增殖的抑制作用间接影响了碱性磷酸酶的活性。