MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究

被引：5

作者：

汪千力 ^{[1
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居丽雯 ^{[1
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蒋露芳 ^{[1
]}

蔡韵 ^{[1
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高颖阳 ^{[2
]}

姜庆五 ^{[1
]}

机构：

[1] 复旦大学公共卫生学院流行病学教研室,公共卫生安全教育部重点实验室

[2] 上海市闵行区疾病预防控制中心

来源：

中华疾病控制杂志 | 2012年 / 16卷 / 10期

关键词：

上皮样细胞; 肠道病毒感染; 传染病;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.5 [微生物学检验];

学科分类号：

100208 ;

摘要：

目的建立犬肾细胞(MDCK)、人喉表皮癌细胞(HEp-2)和非洲绿猴肾细胞(Vero)3种细胞(MHV)混合细胞瓶冻存复苏方法,经冻存复苏的混合细胞用于分离常见呼吸道和肠道病毒,建立病毒性病原检测的方法学平台。方法对数生长期的MDCK、HEp-2和Vero细胞等量保存在含8%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DM-SO)冷冻保存液中,液氮经冻存4个月后复苏并进行细胞计数;在复苏后0 h、24 h和48 h倒置显微镜下观察细胞形态、细胞汇合;并用于分离培养常见呼吸道、肠道病毒,观察致细胞病变效应,采用直接与间接免疫荧光法鉴定。结果在液氮中保存4个月的MHV混合细胞,细胞复苏存活率超过99.20%,镜下细胞折光度好,细胞形态良好,均见到相应的致细胞病变效应和免疫荧光检测阳性结果。结论 MDCK、HEp-2和Vero细胞等量保存在含8%DM-SO冷冻保存液中液氮保存4个月复苏存活率高。混合细胞直接冻存复苏方法建立,为常见的病毒性病原分离培养提供了宽泛的合适细胞宿主,保证了病毒性传染病的快速诊断、实验室病毒性传染病监测的可操作性。

引用

页码：827 / 832

页数：6

共 8 条

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