保存温度与时间对动物组织DNA提取质量的影响

[目的]研究不同保存温度、不同保存时间对蟹肉总DNA提取质量的影响,为同类研究提供借鉴。[方法]将样品在4、-20和-40℃下分别保存4、8和15d,提取螯足内肌肉总DNA,测定总DNA的紫外吸收值,并设计引物扩增其mtDNAND6基因,采用琼脂糖凝胶电泳分别对提取的总DNA及PCR结果进行检测。[结果]由鲜活蟹组织提取的DNAA260与A280的比值因蛋白污染而较低;15d内4℃与-40℃条件下保存的DNA提取率和条带检出率均无明显差异,而-20℃下的保存效果受时间影响明显。各处理组合总DNA的A260与A280比值在1.79～2.00;利用上述DNA作模板,扩增其特定基因mtDNAND6均可获得预期长度的PCR条带。[结论]短期保存组织宜选择4℃,若需较长时间保存时则宜选择-40℃以下的低温。