弓形虫RH株速殖子期表达型cDNA文库的构建及鉴定

被引：8

作者：

杨秋林

陆惠民

邬敏辰

黄伟达

机构：

[1] 苏州医学院寄生虫学教研室!苏州

[2] 复旦大学生命科学院生物化学系!上海

来源：

寄生虫与医学昆虫学报 | 2001年 / 02期

关键词：

弓形虫; cDNA文库; 克隆;

D O I：

暂无

中图分类号：

R382.5 [弓形体];

学科分类号：

100103 ;

摘要：

为构建弓形虫速殖子期表达的基因的完整长度cDNA文库 ,用CF 11纤维素柱快速提纯速殖子 ,以盐酸异硫氰酸胍 (AGPC)一步法抽提总RNA ,oligo dT纤维素分离mRNA后 ,用ClonTech公司的SmartTMPCRcDNA文库构建试剂盒 ,构建了弓形虫RH株的表达型文库。获得 5× 10 6个独立克隆 ,重组率为 99% ,插入片段的平均长度约为 1kb。根据已知序列设计引物 ,从cDNA文库中扩增出编码棒状体蛋白 1(ROP1)的基因 (不含编码信号肽的序列 ) ,本文库可望用于弓形虫疫苗研究的候选基因的筛选。

引用

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