醛脱氢酶基因敲除对克氏肺炎杆菌合成1,3-丙二醇的影响

被引：12

作者：

张延平

杜晨宇

黄志华

刘铭

曹竹安

机构：

[1] 清华大学化学工程系生物化工研究所

来源：

化工学报 | 2006年 / 11期

关键词：

醛脱氢酶; 1,3-丙二醇; 乙醇; 克氏肺炎杆菌;

D O I：

暂无

中图分类号：

TQ223.162 [];

学科分类号：

摘要：

利用Klebsiellapneumoniae厌氧发酵甘油生产1,3-丙二醇时,一部分甘油通过氧化代谢途径大量合成副产物乙醇,降低了1,3-丙二醇的得率.醛脱氢酶ALDH是乙醇合成途径的关键酶之一,其催化作用不仅消耗了大量甘油,还将还原型辅酶NADH氧化为NAD+,降低了同为NADH依赖型的1,3-PD合成途径的效率.本文以醛脱氢酶ALDH为改造目标,以K·pneumoniae为宿主,通过同源重组技术在K·pneumoniaeM5aL的ALDH基因中成功地插入了四环素抗性基因,经抗性筛选和基因水平鉴定,得到两株ALDH基因敲除的重组菌0623-1hb及0623-1hc.本文研究了这两株重组菌的生长代谢特性,结果表明两株重组菌的ALDH酶活基本检测不到,菌体生长受到明显抑制,乙醇合成浓度比出发菌株K·pneumoniaeM5aL降低了43%53%,1,3-PD合成浓度及摩尔得率分别提高了27%42%和19%24%.

引用

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