肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因的克隆与鉴定

目的：克隆和筛选肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因。方法：将肺腺癌多药耐药细胞（ SPC- A- 1/CDDP）作为实验方，肺腺癌细胞（ SPC- A- 1）作为对照方，应用抑制消减杂交技术，构建实验方特异表达 cDNA消减文库；用斑点杂交法初步筛选 cDNA消减文库后，将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析（ Genbank），对新的 cDNA序列进行 Northern blot杂交验证。结果：建立了一个肺腺癌多药耐药细胞（ SPC- A- 1/CDDP）特异表达 cDNA消减文库，斑点杂交法初步筛选显示 23个克隆中有 SPC- A- 1/CDDP特异表达 cDNA片断，测序和同源性分析表明 2个 cDNA片断为新序列，其余 cDNA片断与已知基因有 93％～ 100％的同源性， Northern blot杂交结果表明 2个新的 cDNA片断来自 SPC- A- 1/CDDP细胞。结论： 2个新的 cDNA序列可能为未知肺腺癌多药耐药相关基因序列；抑制消减杂交法是克隆特异表达基因的有效方法。