AFLP分析中多态性扩增产物的回收、克隆及鉴定

被引:30
作者
李传友
伏健民
金德敏
翁曼丽
王斌
机构
[1] 中国科学院遗传研究所
关键词
水稻,AFLP,分子标记;
D O I
10.16288/j.yczz.1998.04.001
中图分类号
Q78,Q346 [];
学科分类号
摘要
本研究在摸索和优化了水稻AFLP分析体系的基础上,发展了多态性AFLP产物的高效克隆方法。特异AFLP扩增产物直接从变性聚丙烯酰胺凝胶上分离纯化,再经过一至二轮PCR扩增,即可高效地克隆于pGEM-Teasyvector系统中。本实验利用该方法成功地克隆了水稻温敏核不育等位突变系5460S和5460F间的4个多态性AFLP产物,Southernbloting分析证明其中3个产物在水稻基因组中为单拷贝序列,另一个为低拷贝序列。AFLP技术强有力的多态性检出能力再结合多态性扩增产物的高效克隆方法,为寻找与目标基因紧密连锁的分子标记提供了有力工具。
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共 3 条
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