油菜单倍体植株叶原生质体培养再生植株

以我校选育的94591、373和953863个油菜品种的花粉植株为材料，切取其无菌试管苗幼嫩叶片，将其切成1～2mm细条游离原生质体。原生质体培养采用液体浅层培养、双层培养法。培养基为加有不同细胞分裂素、生长素和天然有机成分的MS液体培养液。原生质体在培养3～6d开始第一次分裂，分裂频率最高可达14．0％，20d后形成多细胞团，35～40d即可形成肉眼可见的愈伤组织。将愈伤组织增殖后转移到附加了细胞分裂素6－BA和GA3的MS固体培养基上进行分化培养，40～60d后，品种94591的愈伤组织分化出不定芽。另二个品种的愈伤组织逐步褐化，未见分化。试管苗转入添加IAA和NAA的生根培养基培养获得了再生植株。