线粒体细胞色素C释放在H2O2诱导内皮细胞凋亡中的作用

被引:17
作者
袁建成
程君涛
秦孝健
肖光夏
机构
[1] 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,第三军医大学西南医院全军烧伤研究所重庆,重庆,重庆,重庆
关键词
细胞培养; 过氧化氢; 细胞色素C; 线粒体;
D O I
暂无
中图分类号
R644 [烧伤及烫伤(灼伤)];
学科分类号
100227 [皮肤病学];
摘要
目的 探讨线粒体及其细胞色素C释放 ,在过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡信号途径中的作用。方法 人脐静脉内皮细胞和 10 0 μmol/LH2 O2 共同培养 2 4h ,或内皮细胞先与环孢霉素A(cyclosporinA ,CsA)孵育 30min后加入H2 O2 ;在不同时相点取细胞作DAPI染色计数凋亡细胞数量 ;同时用Rhoadmine12 3聚集法观察线粒体通透性的变化 ;Westernbolt检测早期线粒体和血浆中细胞色素C浓度的变化。 结果 H2 O2 处理细胞后 ,细胞呈现出典型的凋亡形态 :细胞皱缩 ,胞核致密 ,凋亡小体形成。从处理后 4h起凋亡细胞数量迅速增加 ,至 12h达峰值。CsA可以明显抑制H2 O2 诱导内皮细胞凋亡的作用。H2 O2 可诱导线粒体细胞色素C浓度的下降 ,使得胞浆中细胞色素C浓度升高 ;同样线粒体中Rhoadmine12 3浓度下降 ,线粒体通透性增加 ,而CsA则可以明显抑制二者的变化。 结论 H2 O2 促进细胞色素C释放进入胞浆 ,导致内皮细胞的凋亡。CsA抑制凋亡的机制是通过保护线粒体膜的正常功能来实现的
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