鸭源H9N2亚型流感病毒NS基因的克隆及表达

被引:20
作者
赵思婷
王贵华
张瑞华
金梅林
陈焕春
机构
[1] 华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉
关键词
鸭; 流感病毒; 非结构蛋白; 基因克隆; 基因表达;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2004.05.007
中图分类号
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号
090507 [智慧养殖与动物生产学];
摘要
根据GenBank中收录的H9N2亚型流感病毒的NS基因序列设计合成了 1对引物NSU/NSL ,利用RT PCR扩增出了H9N2株NS基因 ;将该基因片段克隆到 pMD 18 T载体上 ,并对所得到的重组质粒进行酶切分析及序列测定。结果 ,获得了NS基因片段的阳性重组子 ,扩增的NS基因包含NS1基因完整的阅读框架和部分NS2基因 ,其序列与GenBank中收录的其他分离株NS基因比较 ,同源性达 96 %~ 99%。再将克隆的NS基因插入到原核表达载体 pET 2 8a后 ,转化E .coliBL2 1(DE3)感受态细胞 ,在IPTG诱导下获得了预期的蛋白表达 ,所表达蛋白质的分子质量约为 30ku。
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