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鸭源H9N2亚型流感病毒NS基因的克隆及表达
被引:20
作者
:
赵思婷
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华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉
赵思婷
王贵华
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王贵华
张瑞华
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张瑞华
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金梅林
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陈焕春
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:
[1]
华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院,华中农业大学动物医学院湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉
来源
:
中国兽医科技
|
2004年
/ 05期
关键词
:
鸭;
流感病毒;
非结构蛋白;
基因克隆;
基因表达;
D O I
:
10.16656/j.issn.1673-4696.2004.05.007
中图分类号
:
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号
:
090507
[智慧养殖与动物生产学]
;
摘要
:
根据GenBank中收录的H9N2亚型流感病毒的NS基因序列设计合成了 1对引物NSU/NSL ,利用RT PCR扩增出了H9N2株NS基因 ;将该基因片段克隆到 pMD 18 T载体上 ,并对所得到的重组质粒进行酶切分析及序列测定。结果 ,获得了NS基因片段的阳性重组子 ,扩增的NS基因包含NS1基因完整的阅读框架和部分NS2基因 ,其序列与GenBank中收录的其他分离株NS基因比较 ,同源性达 96 %~ 99%。再将克隆的NS基因插入到原核表达载体 pET 2 8a后 ,转化E .coliBL2 1(DE3)感受态细胞 ,在IPTG诱导下获得了预期的蛋白表达 ,所表达蛋白质的分子质量约为 30ku。
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[1]
禽流感.[M].甘孟侯主编;.中国农业出版社.2002,
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分子克隆实验指南.[M].(美)J.萨姆布鲁克(JosephSambrook);(美)D.W.拉塞尔(DavidW.Russell)著;黄培堂等译;.科学出版社.2002,
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中国兽医学报,
2001,
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李建国
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贝东
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中华实验和临床病毒学杂志,
1999,
(02)
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禽流感.[M].甘孟侯主编;.中国农业出版社.2002,
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唐秀英
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中国兽医学报,
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禽H9N2亚型流感病毒能感染人的发现
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中华实验和临床病毒学杂志,
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