汉滩病毒包膜糖蛋白G1和G2重组杆状病毒表达载体的构建与表达及其免疫原性

将汉滩病毒（ＨＴＮＶ）Ｍ基因插入杆状病毒转移质粒ｐＡｃＹＭＩＢ多角体启动子下游附近，与Ｂｓｕ３６１酶切线性化的杆状病毒（ＡｃＶＥＰＡ）ＤＮＡ共同转染Ｓｆ９细胞，经空斑筛选获得了表达包膜糖蛋白（Ｇ１、Ｇ２）的重组杆状病毒（ＡｃｖＨａｎＭ）。经纯化ＡｃＶＨａｎＭＤＮＡ的Ｓｏｕｔｈｅｍｂｌｏｔ证实，Ｍ基因正确插入了杆状病毒基因组中。用抗糖蛋白混合单克隆抗体和病人血清做免疫荧光染色，观察到细小的特异性荧光颗粒，呈典型的核周分布。免疫荧光检测还证实，重组糖蛋白与９株抗糖蛋白单抗均起反应，提示重组糖蛋白的抗原位点分布与病毒毒粒糖蛋白相同或相似，用放射免疫沉淀（ＲＩＰ）分析仅显示Ｇ２带，且表达的Ｇ２分子量略小于病毒Ｇ２，这可能与两者的糖基化程度不同有关。研究还表明，重组糖蛋白具有细胞融合活性。