痢疾基因工程三价菌苗候选株的构建

被引:5
作者
王恒樑
冯尔玲
林云
廖翔
金明
黄留玉
苏国富
黄翠芬
机构
[1] 军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,海军医学研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所北京,北京,上海
关键词
痢疾杆菌; ctxB基因; 平衡致死系统; 菌苗;
D O I
暂无
中图分类号
Q789 [基因工程的应用];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
通过DNA体内外同源重组, 用霍乱毒素B亚单位基因(ctxB)完全取代了福氏志贺氏2a T32株染色体上的asd基因, 获得了稳定表达CtxB的DAP依赖株FWL01. 随后, 用T32株的asd基因标记志贺氏宋内S7株的Ⅰ相大质粒, 并将其诱动至FWL01, 构成三价菌苗候选株FSW01. 在该菌苗候选株中, 表达宋内Ⅰ相O抗原的大质粒与宿主菌是平衡致死的. 因此, 该候选株在没有任何抗生素存在情况下, 能稳定地表达福氏 2a, 宋内O抗原和CtxB. 豚鼠眼角膜试验和HeLa细胞侵袭试验证明FSW01无毒, 家兔免疫试验证实了其有很好的免疫原性. 小鼠和猴体免疫保护试验显示该候选株对相应的有毒株攻击具有很好的保护效果.
引用
收藏
页码:445 / 452
页数:8
相关论文
共 8 条
[1]   利用宿主-载体平衡致死系统构建志贺氏菌3价疫苗候选株 [J].
芮贤良 ;
徐永强 ;
吴旭东 ;
苏国富 ;
黄翠芬 .
中国科学C辑:生命科学, 1997, (01) :83-88
[2]   宋内Ⅰ相O抗原及霍乱毒素B亚基在福氏2a痢疾菌中的表达及其免疫保护效果的观察 [J].
钱锋,芮贤良,苏国富,黄翠芬 .
遗传学报, 1996, (04) :322-328
[3]   稳定、无抗药的痢疾福氏2a和宋内双价菌苗候选株的构建 [J].
芮贤良 ;
徐永强 ;
王红 ;
苏国富 ;
黄翠芬 .
生物工程学报, 1996, (02) :134-139
[4]  
宋内志贺氏和T32-Istrati二价菌株的组建及其特性检定[J]. 王秉瑞,宋树珍,陈锦荣,曾仑,田玉珍.中华微生物学和免疫学杂志. 1987 (06)
[5]  
用汞抗性转座子Tn501构建双价菌苗株[J]. 牟兆钦,邢丽,毛培基.中华微生物学和免疫学杂志. 1990 (02)
[6]   宋内氏痢疾菌120Md质粒及其变异株质粒的研究 [J].
刘伟 ;
王秉瑞 .
中华微生物学和免疫学杂志, 1990, 10 (04)
[7]   HIGH-FREQUENCY MOBILIZATION OF THE CHROMOSOME OF ESCHERICHIA-COLI BY A MUTANT OF PLASMID RP4 TEMPERATURE-SENSITIVE FOR MAINTENANCE [J].
HARAYAMA, S ;
TSUDA, M ;
IINO, T .
MOLECULAR & GENERAL GENETICS, 1980, 180 (01) :47-56
[8]  
Transposon vectors containing non-antibiotic resistance selection markers for cloning and stable chromosomal insertion of foreign genes in Gram-negative bacteria .2 Herrero M,Lorenzo V,Timmis K. J Bacteriol . 1990