转基因油菜地高辛标记DNA探针杂交检测方法的建立

被引:7
作者
刘?
郑文杰
赵卫东
贺艳
唐丹舟
刘辉
机构
[1] 天津出入境检验检疫局
[2] 天津出入境检验检疫局 300201
关键词
杂交; PCR; 转基因油菜; 地高辛标记探针;
D O I
暂无
中图分类号
S565.4 [油菜籽(芸薹)];
学科分类号
0901 ;
摘要
通过PCR扩增法制备转基因油菜外源筛选基因FMV35S启动子的DIG-11-dUTP标记DNA探针,与该基因PCR扩增产物进行Southern杂交,通过显色反应对商品化转基因油菜进行检测。本研究对反应基片带正电荷的尼龙膜和硝酸纤维素膜进行了比较,并比较了不同固定条件和杂交条件下的杂交结果。尼龙膜较之硝酸纤维素膜可更好的结合DNA片段,经紫外线照射交联5 分钟,与含甲酰胺的杂交液在45℃杂交30 min结果较为理想。
引用
收藏
页码:10 / 12
页数:3
相关论文
共 5 条
[1]   1999年全球转基因作物商品化概述 [J].
CliveJames ;
孙雷心 .
生物技术通报, 2000, (03) :39-41
[2]  
分子克隆实验指南[M]. 科学出版社 , (美)J.萨姆布鲁克(J.Sambrook)等著, 1992
[3]  
Detection and amplification systems for sensitive, multiple-target DNA and RNA in situ hybridization: looking inside cells with a spectrum of colors[J] . Ernst J. M. Speel.Histochemistry and Cell Biology . 1999 (2)
[4]  
Non-radioactive in situ hybridization for mRNA with emphasis on the use of oligodeoxynucleotide probes[J] . D. M. Hougaard,Henrik Hansen,Lars-Inge Larsson.Histochemistry and Cell Biology . 1997 (4-5)
[5]  
Non-radioactive in situ hybridization for mRNA with emphasis on the use of oligodeoxynucleotide probes .2 David MH,Herik H. Histochem Cell Biol . 1997