小麦耐盐基因的标记和标记的克隆

普通小麦 (TriticumaesticumL .)耐盐农家品种茶淀红与盐敏感品种农大 85 0 2 1杂交 ,对杂交后代 14 1株F2 分离个体进行耐盐性鉴定。通过遗传分析和卡方检验证实小麦耐盐农家品种茶淀红含有一个主效耐盐基因 ,杂交后代符合 1∶2∶1的分离规律。依据混合群体分组分析法 (BulkedSegregateAnalysis ,BSA)建立耐盐基因池和盐敏感基因池 ,通过RAPD实验 ,从 5 2 0个引物中筛选出了一个在两池间具有多态性的引物OPZ0 9,用双亲、F1、F2 单株DNA进行RAPD实验证明了该引物扩增出的特异性片段OPZ0 9 5 90是一个与茶淀红耐盐基因连锁的RAPD标记 ,用JOINMAPVersion 1 4计算基因与标记间的重组值为 5 6 74 % ,连锁距离为 6 5 5 7cM。从琼脂糖凝胶回收OPZ0 9 5 90与载体pUCm T连接 ,并转入受体菌JM10 9,对克隆片段测序表明其实际大小为 5 91bp ,故此小麦茶淀红耐盐基因的RAPD标记为OPZ0 9 5 91。