氧浓度与CagA+幽门螺杆菌对人胃癌SGC7901细胞系HIF-2α和Oct-4表达影响的研究

目的:通过观察常氧与低氧下CagA+幽门螺杆菌(Hp)对人胃癌SGC7901细胞系HIF-2α和Oct-4表达的影响,初步探讨Hp在胃癌发生发展中的干细胞机制,及其与肿瘤微环境低氧的协同作用。方法:内镜下采集胃黏膜标本后行Hp培养并鉴定,PCR方法鉴定CagA基因。CagA+Hp与胃癌SGC7901细胞于常氧和低氧环境下共培养48h(分常氧对照组、低氧对照组、常氧CagA+Hp组、低氧CagA+Hp组)。免疫细胞化学法检测HIF-2α和Oct-4蛋白的表达,RT-PCR法检测Oct-4mRNA的表达。结果:免疫细胞化学结果显示,常氧下胃癌SGC7901细胞HIF-2α和Oct-4蛋白呈低水平表达,表达量分别为0.263 9±0.008 0和0.317 9±0.001 3。低氧和CagA+Hp均能显著诱导HIF-2α和Oct-4蛋白表达,与常氧对照组的相比,HIF-2α表达量为0.431 8±0.001 2和0.422 5±0.017 0,t值分别为46.410 3和18.875 6,P<0.01;Oct-4为0.546 8±0.008 2和0.478 9±0.001 8,t值分别为61.649 1和162.139 0,P<0.01。与低氧对照组和常氧CagA+Hp组相比,低氧CagA+Hp组蛋白表达量进一步升高,HIF-2α为0.507 7±0.007 0,t值分别为23.896 8和10.362 5,P<0.01;Oct-4为0.698 7±0.005 1,t值分别为35.173 7和90.876 1,P<0.01。相关分析显示,HIF-2α与Oct-4表达呈正相关,r=0.964 0,P<0.05。RT-PCR检测各组Oct-4mRNA表达结果显示与免疫细胞化学结果一致。结论:常氧下CagA+Hp可刺激胃癌细胞HIF-2α和Oct-4表达,低氧环境下其表达进一步增加,表明CagA+Hp和低氧对HIF-2α和Oct-4的表达有协同作用。提示CagA+Hp和低氧可能是诱导胃癌细胞干细胞化的重要原因。