多重PCR-DHPLC检测4种主要致腹泻性大肠埃希氏菌方法的建立与应用

被引：7

作者：

徐义刚 ^{[1
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崔丽春 ^{[2
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李苏龙 ^{[1
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曹际娟 ^{[3
]}

姜艳春 ^{[1
]}

张子群 ^{[1
]}

刘新亮 ^{[1
]}

机构：

[1] 不详

[2] 黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心

[3] 不详

[4] 东北林业大学

[5] 辽宁出入境检验检疫局

[6] 不详

来源：

食品科学 | 2010年 / 20期

关键词：

致腹泻性大肠杆菌; 聚合酶链式反应; 变性高效液相色谱; 检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

TS207.4 [食品的微生物检验];

学科分类号：

摘要：

肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)和肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)是引起腹泻、危害食品安全和人类健康的4种主要大肠杆菌。本实验基于ETEC LT基因、EPEC bfpA基因、EHEC O抗原基因和EIEC侵袭性质粒基因序列,设计了4对特异性引物,利用聚合酶链反应(PCR)和变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术,通过体系优化,建立了致腹泻性大肠杆菌多重PCR-DHPLC检测方法,达到同时检测4种致病菌的目的。该方法灵敏度高,最低检测限为EHEC6×101拷贝/μL、ETEC1.3×102拷贝/μL、EPEC9×101拷贝/μL、EIEC7×101拷贝/μL。特异性试验表明,对22种共41株细菌进行检测,所试6株致腹泻性大肠杆菌均为阳性。实践证明,该方法具有良好的实用性,可用于ETEC、EPEC、EHEC和EIEC的单一或混合感染的检测。

引用

页码：293 / 297

页数：5

共 9 条

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