转化生长因子-β1反义RNA腺病毒载体的构建

被引：1

作者：

史伟

刘双信

梁馨苓

丁国印

余细勇

梁永正

杨周灼

机构：

[1] 广东省人民医院肾内科

[2] 广东省人民医院心脏病研究所药理研究室

[3] 广东省人民医院肾内科广州

[4] 广州

[5] 进修医生广州

来源：

中华肾脏病杂志 | 2001年 / 02期

关键词：

转化生长因子β1; 反义RNA; 腺病毒载体; 基因治疗;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

目的构建含转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）反义ＲＮＡ的重组腺病毒重组体。方法将ＴＧＦ－β１的ｃＤＮＡ５’端６３０ｂｐ片段反向插入穿梭载体ｐＡｄＴｒａｃｋ－ＣＭＶ，构建为ＴＧＦ－β１反义ＲＮＡ的重组体（ｐＡｄＴｒａｃｋ－ａｎｔｉＴＧＦβ１），将重组体ｐＡｄＴｒａｃｋ－ａｎｔｉＴＧＦβ１与包装质粒ｐＡｄＥａｓｙ－１共转染ＢＪ５１８３细菌。用选择培养基筛选同源重组的阳性克隆，同源重组的腺病毒载体转染２９３细胞，在荧光显微镜下观察细胞中的绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）及ＰＣＲ扩增目的基因等方法鉴定重组的腺病毒。结果构建了含ＴＧＦ－β１反义ＲＮＡ的重组腺病毒，其滴度为２．４ × １０９ＰＦＵ／ｍｌ。结论该重组腺病毒在治疗肾小球肾炎及肾小球硬化的研究中有一定的应用前景，为肾小球硬化的治疗及研究提供了一种研究手段。

引用

页码：105 / 109

页数：5

共 8 条

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