异源Harpin对软腐欧氏杆菌与植物互作关系的影响附视频

本文通过三亲交配将带有梨火疫欧文氏杆菌功能完整的 hrp基因簇的重组粘粒 p CPP4 30转移到了胡萝卜软腐欧氏杆菌 (Erwinia carotovora) Se9R中。从接合子中提纯的质粒与 p CPP4 30的大小、酶切图谱相同 ;以该质粒为模板 ,用针对 hrp N序列的引物经 PCR扩增得到与 hrp N大小相同的片段 ;用地高辛标记的 hrp N作为探针进行 Southern blotting分析 ,在接合子中的质粒上得到预期的杂交带。接合子可以在烟草叶片上稳定地引起过敏反应。另外 ,接合子可以在寄主马铃薯叶片上引起过敏反应样枯斑 ,表明异源 harpin的表达及功能不受软腐菌的抑制。该接合子在体外产生的果胶酸裂解酶活性与受体菌 Se9R无明显差别。低浓度的接合子在马铃薯块茎上的软腐症状明显低于受体菌 Se9R。外源harpin表达可能不改变软腐欧氏杆菌的致病力、而是通过诱导马铃薯抗性达到减轻发病的作用。