骨髓间充质干细胞移植对实验性大鼠缺血性脑梗死免疫炎性反应的影响研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞移植对实验性大鼠缺血性脑梗死免疫炎性反应的影响,为脑梗死治疗提供方法。方法:（1）实验性大鼠缺血性脑梗死模型建立。选择2015年3月2017年5月实验室进行实验的SD大鼠60例,采用改良Zea-longa线栓法完成大鼠缺血性脑梗死模型建立。（2）干细胞的获取及培养。另取大鼠5只,利用DMEM培养基冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞,采用贴壁法完成大鼠骨髓间充质干细胞分离制备。（3）模型大鼠处理。将建模成功后的大鼠60只,随机分为模型组、对照组和实验组。模型组建模后仅进行血管结扎,不插入线栓;对照组在病灶部位注入等体积PBS;实验组在病灶部位注入10μl第三代骨髓间充质干细胞,测定三组大鼠免疫水平、炎性因子水平,评估骨髓间充质干细胞在实验性大鼠缺血性脑梗死大鼠中的应用效果。结果:（1）倒置显微镜下第3天第一代骨髓间充质干细胞体积增大,呈多角形或长梭形,细胞开始聚集,第3代细胞迅速增殖,排列具有一定的方向性,呈旋涡状生长,并且具有多层,界限不清;（2）荧光显微镜观察结果表明:获得细胞中99%被荧光标记,获得的细胞为骨髓间充质干细胞;（3）对照组与模型组治疗后1个月、2个月及3个月神经功能评分比较,差异无统计学意义（P>0.05）;实验组治疗后1个月、2个月及3个月神经功能评分,低于对照组与模型组（P<0.05）;（4）实验组治疗后3个月IL-6、IFN-γ水平,高于对照组（P<0.05）;实验组治疗后3个月IL-10及TGF-β水平,低于对照组（P<0.05）;（5）实验组大鼠治疗后1个月、2个月及3个月CD4+CD25+Tregs细胞占CD4+T细胞的百分比,高于对照组与模型组（P<0.05）。结论:移植骨髓间充质干细胞有助于调节大鼠免疫,降低炎症因子水平,能促进神经功能早期恢复。