血管生成抑制剂arresten的cDNA一步法克隆与原核表达

被引：3

作者：

何爱彬

曾昭淳

机构：

[1] 重庆医科大学基础医学院生物化学教研室

[2] 重庆医科大学基础医学院生物化学教研室重庆

[3] 重庆

来源：

重庆医科大学学报 | 2004年 / 03期

关键词：

cDNA克隆; 巢式PCR; 一步法克隆;

D O I：

10.13406/j.cnki.cyxb.2004.03.026

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的 :克隆与表达arresten ;方法 :从正常的肝组织提取总RNA ,逆转录成cDNA ,根据软件RNASTRUCTURE3.5设计两对引物 ,巢式PCR扩增arresten基因 ,其中每个内引物 5’端加上特殊核苷酸 ,PCR产物用T4DNAPolymerase处理后直接与用NdeI ,EcoRI酶切的表达质粒pTYB1连接 ,转化大肠杆菌ER2 5 6 6。筛选重组子 ,诱导表达。结果 :快速一步法克隆表达了arresten。讨论 :一步法克隆快速 ,高效

引用

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