猪细小病毒NS1基因的克隆及表达

被引：9

作者：

吕建强

陈焕春

赵俊龙

何启盖

机构：

[1] 华中农业大学畜牧兽医学院

[2] 华中农业大学畜牧兽医学院湖北武汉

[3] 湖北武汉

来源：

中国兽医学报 | 2003年 / 05期

关键词：

猪细小病毒; NS1基因; 克隆; 表达;

D O I：

10.16303/j.cnki.1005-4545.2003.05.007

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

根据 Bergeron等报道的猪细小病毒基因组序列设计引物 ,在下游引物中引入 Bgl 酶切位点以便于构建表达载体。利用 PCR技术扩增得到 NS1 全基因 ,将其克隆到 p MD18- T载体中进行序列测定并分析 ,进而构建重组转移载体p Fast- NS1 ,在 DH1 0 Bac大肠杆菌中与改造过的苜蓿夜蛾核型多角体病毒 (Ac NPV )基因组 (Bacmid)发生同源重组 ,获得重组穿梭载体 Bacmid- NS1 ,经脂质体介导转染 Sf9细胞后 ,得到重组杆状病毒 (Ac NPV- NS1 )。SDS- PAGE、Western-blotting分析可见大小约为 84 0 0 0的特异性带 ,表明 NS1 蛋白在杆状病毒 Bac- To- Bac表达系统中成功地实现了表达 ,从而为研究其结构与功能创造了条件。

引用

页码：435 / 437

页数：3

共 5 条

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