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重组大鼠pAT153+IGF-1基因单独转染及其与pcDNA3+TGF-β1基因共同转染兔软骨细胞的实验研究
被引：5
作者：
向川
杜靖远
翁习生
卫小春
机构：
[1] 山西医科大学第二医院骨科
[2] 武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科
[3] 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院骨科
[4] 山西医科大学第二医院骨科 太原
[5] 太原
来源：
关键词：
软骨细胞;
基因;
转染;
D O I：
暂无
中图分类号：
R684 [关节疾病及损伤];
学科分类号：
100220 [骨科学];
摘要：
目的通过对比重组大鼠胰岛素样生长因子1基因(pAT153+IGF-1)单独转染及其与重组大鼠转化生长因子β1基因(pcDNA3+TGF-β1)共转染兔软骨细胞后细胞增生及TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原含量的变化,探讨pAT153+IGF-1、pcDNA3+TGF-β1转染对兔软骨细胞分裂增生及分泌合成功能的影响,为将来可能的骨关节炎(OA)基因治疗提供理论基础。方法提取重组大鼠基因pAT153+IGF-1和pcDNA3+TGF-β1,将体外培养的兔膝关节软骨细胞分别用pAT153+IGF-1单转染、pAT153+IGF-1和pcDNA3+TGF-β1共转染,筛选阳性克隆后,对软骨细胞及其所分泌的TGF-β1、IGF-1、Ⅱ型胶原进行原位杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测、流式细胞仪检测、3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)检测。结果基因转染组与空白组相比,TGF-β1、IGF-1、Ⅱ型胶原的含量均明显提高,DNA合成记数及细胞周期S期的比例也明显高于空白组(P<0.05);基因共转染组的上述指标较pAT153+IGF-1单转染组高,差异有显著性(P<0.05)。结论基因pAT153+IGF-1、pcDNA3+TGF-β1转染软骨细胞后,TGF-β1、IGF-1及Ⅱ型胶原含量显著增高,细胞增生及细胞数量明显增多,上述基因转染有助于软骨细胞活力的提高;pAT153+IGF-1和pcDNA3+TGF-β1双基因共转染兔软骨细胞后对软骨细胞分裂增生及分泌合
引用
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