VEGF反义核酸对HL-60细胞作用和机制研究

本研究探讨血管内皮生长因子 (VEGF)反义核酸对HL 6 0细胞生长的量效和时效关系 ,并研究其作用机制以揭示VEGF基因新的功能。用含 2 0个脱氧核糖核酸的反义核酸A7(用计算机模拟设计和实验筛选出的最优序列 )全硫代修饰 ,以脂质体介导进入细胞 ,培养 72小时后用MTT法计算细胞生长抑制率 ;采用台盼蓝拒染法每2 4小时观察细胞存活情况并计数 ;用Giemsa染色观测细胞形态学改变 ;用流式细胞仪检测细胞凋亡百分数 ;用VEGFELISA试剂盒测定蛋白的水平。结果显示 ,反义药物对HL 6 0细胞生长有明显抑制作用 ,呈剂量依赖关系 ,并且下调VEGF蛋白的表达 ;反义药物对HL 6 0细胞的凋亡无明显影响。结论 :VEGF反义药物抑制HL 6 0细胞生长的机制是抑制细胞增殖 ,而不是促进细胞凋亡 ,内源性VEGF蛋白具有促进HL 6 0细胞增殖的功能。