小鼠颅骨成骨细胞的分离培养及生物学鉴定

被引：11

作者：

王钦 ^{[1
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李辉 ^{[1
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张磊 ^{[1
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覃琦丽 ^{[1
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薛林涛 ^{[1
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滕维中 ^{[2
]}

石德顺 ^{[1
]}

机构：

[1] 广西大学动物繁殖研究所

[2] 广西大学物理科学与工程学院

来源：

广西农业生物科学 | 2008年 / 04期

关键词：

成骨细胞; 分离培养; 鉴定; 碱性磷酸酶; 小鼠;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q813 [细胞工程];

学科分类号：

100113 [医学细胞生物学];

摘要：

对小鼠成骨细胞的体外分离培养方法进行了摸索,并对其生物学特性进行了鉴定。手术法分离新生小鼠颅骨骨片,用0.25%胰蛋白酶+0.02%乙二胺四乙酸(EDTA)预消化20～30 min,而后用0.08%胶原酶+0.05%胰蛋白酶+0.004%EDTA的复合酶多次消化(每次10 min)收集细胞,然后接种于细胞培养瓶中进行培养,并通过苏木精-伊红(HE)染色、BCIP/NBT Kit碱性磷酸酶(ALP)染色、VonKossa法钙结节染色和四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法对培养细胞进行生物学鉴定。结果发现,分离得到的细胞92%为存活细胞,差速贴壁培养后可筛选得到高纯度的成骨细胞,原代培养8 d后可形成单层细胞,传代培养6～7 d后可形成单层细胞。这些细胞有ALP活性,并具有体外钙化能力。结果表明,本研究建立的小鼠成骨细胞分离培养与鉴定方法是可行的。

引用

页码：325 / 328+387 +387

页数：5

共 11 条

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